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注意几点即可防止胎牛血清培养中黑点的生成——菲亚

有客户咨询胎牛血清细胞培养中黑点如何防止生成?对此我司经过详细分解,得出以下结论,为防止客户由于操作方面而使黑点生成的办法。对此一定要做好以下几点。方可使细胞培养顺利。
(1) 尽可能地减少血清冻融次数。 
(2) 培养基无需 37℃水浴。 
(3) 培养基保持* PH 值 7。0- 7。2。 
(4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。 
(5) 掌握细胞传代的*时机,细胞切勿生长过老。
1、 化冻 将血清从-20 度冰箱中取出,室温(或浸于自来水中)化冻(约需要 30 分钟至 2 小时,也可放于 4 度冰箱化冻过夜;化冻后若不马上灭活,可以放入 4 度冰箱中暂时保存) 
2、灭活 
(1)放入室温的水浴锅内开始加热(同时放入一个空的血清瓶,内装 100ml 自来水,插入一根温度 计,温度监控以此为准) 
(2)当温度计显示 56 度时,停止加热,改为间断加热,维持 56 度(±0.5 度)30 分钟(±3 分钟; 若不小心使温度上升超过 56 度,则:若仍未超过 60 度,且时间很短,比如不超过 5 分钟,则仍可使 用;若超过 60 度,或者时间较长,则弃去不用,或者尝试用于一些普通细胞的培养) 
(3)取出,自然冷却至室温(约需 1-3 小时) ,可分装或-20 度继续冻存。
 3、分装 
(1)转入无菌间,在超净台内将血清分装入 10ml 离心管中(注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀; 用吸液管或吹大管吹出血清时要注意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很容易产生气泡;如果产生气泡, 则在酒精灯火焰上过一下) ) 
(2)放入-20 度冰箱冻存 
(3)全部操作约需要 4-6 小时

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