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牛ELISA试剂盒样本处理五部曲

牛ELISA试剂盒样本前处理是酶联免疫试验中关键的一步,稍有不慎将导致实验满盘皆输,如何安全,快捷的处理样本,样本处理五部曲助您精彩实验。
1、均质
    组织样本:肉、肝食品类切细,用绞肉机反复绞碎,混合均匀。
    水产样本:去除样品的非食用部分,食用部分切细,用均质器均浆;原料表面较脏时,需适当用蒸馏水清洗。
    蛋类:鲜蛋去壳,蛋黄和蛋白充分混匀。
    水果、蔬菜类:先用水洗去泥沙,然后除去表面的水分,取食用部分。
2、振荡提取
    将提取溶剂加入到装有样品的具塞容器中,振荡,使提取溶剂与容器内的样品充分接触以深入到样本组织内部,提取待测组分。
2.1振荡方式:振荡器上进行上下、往返式振荡、手摇式上下振荡。
2.2 在组织样本中加入有机溶剂之间提取时,应边加边振荡,防止组织凝结成团,不利于提取。
3、在用有机溶剂提取过程中,如果出现乳化现象,解决的方法有:①用细头轻轻的搅拌,破坏乳化后,再重复离心。②再加入适量的提取剂,重新振荡。注意离心后要保证样本的稀释倍数不变。
4、浓缩
    由于净化过程中引入的溶剂,可能会降低待测组分的浓度或者不适宜直接分析,需要去除全部有机溶剂。即试剂盒前处理步骤中把样本在60℃氮气下吹干,牛ELISA试剂盒再用复溶液溶解干燥残留物。
5、 注意:
(1)在吹干样本之前,用甲醇清洗针头,防止杂质干扰。
(2)在吹样本时,针头应在液面上空,避免与样本接触,防止产生交叉污染。
(3)样本吹干后应立即取下,避免吹的时间过长,影响最终检测结果。
(4)不同的药物,吹干后样本的保质期不同,提倡待样本回到室温后立即复溶。
6 、净化
    经过提取的待测组分中通常含有一些会干扰试剂盒中抗原抗体反应的杂质或者是含有与待测物结构相似的杂质。将待测组分与杂质分离的过程,我们称为试剂盒中样本的净化。在我们现有的试剂盒前处理方法中涉及到的最常见的净化是:液液分配法。
    比如:用复溶液溶解干燥残留物之前先加入适量的正己烷,在加入正己烷和复溶液涡动后如果出现乳化现象,可以60℃水浴加热,至乳化现象消失或减弱后,加大离心转速进行离心。

温馨提示ELISA实验使用注意事项:

1、牛ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间需控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线,需做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
6、本试剂不同批号组分不得混用。
7、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9、底物请避光保存。

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